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當(dāng)前位置：
腺病毒載體構(gòu)建
來源: | 作者:proef7446 | 發(fā)布時間: 2132天前 | 4635 次瀏覽 | 分享到:
腺病毒（Adenovirus，AdV）是一種非整合型雙鏈DNA病毒。由于其可以感染呼吸道和消化道，不僅可以靜脈注射，還可以通過口服經(jīng)腸道吸收，或通過噴霧、滴注經(jīng)呼吸道吸收，使得它所介導(dǎo)的基因治療易于推廣應(yīng)用，并且腺病毒易于制備、純化和濃縮，外源基因裝載容量大，所以重組腺病毒已越來越廣泛地被應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床試驗中，并成為世界上最常用的基因治療載體之一。




百菱生物生物所用的腺病毒包裝系統(tǒng)是AdMax系統(tǒng)。它的工作原理是將攜帶外源基因的腺病毒穿梭質(zhì)粒與攜帶了腺病毒大部分基因組的輔助包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞，利用Cre/loxP（或FLP/frt）重組酶系統(tǒng)的作用實現(xiàn)重 組，產(chǎn)生重組腺病毒。
這個系統(tǒng)操作簡便、重組效率高、獲得的病毒產(chǎn)率高、目的基因的表達(dá)水平高，與目前使用最普及的AdEasy系統(tǒng)相比，有一定的優(yōu)勢：AdMax系統(tǒng)只需要2~4周就能完成從質(zhì)粒構(gòu)建到重組出毒，成功率大于98%，因在真核細(xì)胞內(nèi)重組出毒，保持了對腺病毒的生存壓力，有助于重組腺病毒的基因組的完整性，并且病毒的產(chǎn)率（Yielding）明顯提高。
服務(wù)詳情：

服務(wù)內(nèi)容

提供產(chǎn)品及數(shù)量

實驗周期

載體構(gòu)建

構(gòu)建報告

2~4周

慢病毒

過表達(dá)慢病毒

1ml ≥1×108 TU/ml

40工作日

shRNA慢病毒

1ml ≥1×108 TU/ml

20工作日

對照慢病毒

200μl≥1×108 TU/ml

/

滴度檢測

2份

/

腺病毒

病毒包裝

上清10ml ≥1×108~9 PFU/ml

2~3周

ADGFP對照腺病毒

1~2×1011 PFU/ml

/

滴度檢測

2份

/

目的基因RT-qPCR檢測

檢測報告單

5工作日

目的蛋白表達(dá)WB檢測（客戶提供一抗）

檢測報告單

1~2周