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性價(jià)比超高的地高辛標(biāo)記試劑盒

來源: | 作者:百菱生物 | 發(fā)布時(shí)間: 565天前 | 956 次瀏覽 | 分享到:

此文章轉(zhuǎn)載自：百代生物

地高辛標(biāo)記是目前公認(rèn)的最靈敏的DNA和RNA探針非放射性標(biāo)記技術(shù)，適用于Southern雜交、Northern雜交、原位雜交、染色體雜交、斑點(diǎn)雜交和文庫篩選等幾乎所有的分子雜交場(chǎng)景，應(yīng)用非常廣泛。

目前，使用較廣的地高辛標(biāo)記試劑是Roche公司的隨機(jī)引物標(biāo)記試劑盒（Dig DNA Labeling and Detection Kit）和地高辛RNA標(biāo)記試劑盒（Dig RNA Labeling Kit）。

這二種試劑盒都具有非常優(yōu)異的探針標(biāo)記性能，但缺點(diǎn)也非常明顯，那就是價(jià)格昂貴，以至于很多研究者都望而卻步。并且，在有些時(shí)候，國(guó)內(nèi)貨源緊張，到貨時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)研究進(jìn)展影響很大。

百代生物海歸團(tuán)隊(duì)經(jīng)長(zhǎng)期研發(fā)，研發(fā)成功了可高效進(jìn)行地高辛標(biāo)記的試劑盒----BIOG地高辛標(biāo)記試劑盒。

試劑盒采用熱啟動(dòng)PCR技術(shù)，對(duì)DNA和cDNA模板進(jìn)行地高辛標(biāo)記，與隨機(jī)引物法和RNA探針相比，具有非常顯著的性能優(yōu)勢(shì)。其一，PCR是目前公認(rèn)的效率高的DNA體外擴(kuò)增技術(shù)之一，BIOG地高辛標(biāo)記試劑盒采用PCR技術(shù)進(jìn)行探針制備，只需非常微量的模板，就能制備出大量的高活性的地高辛標(biāo)記探針。

取5ng Hela細(xì)胞基因組DNA為模板，使用BIOG地高辛標(biāo)記試劑盒標(biāo)記GAPDH，就可以制備出高達(dá)1ug較純的均質(zhì)化的GAPDH探針。

其二，BIOG地高辛標(biāo)記試劑盒使用了我公司基因工程優(yōu)化的超級(jí)熱啟動(dòng)Taq酶，

該酶經(jīng)嚴(yán)格的化學(xué)封閉，在室溫下完全沒有活性，可最大程度地減少因引物模板錯(cuò)配以及引物二聚體形成等導(dǎo)致的非特異性標(biāo)記，探針標(biāo)記特異性高。

其三，試劑盒配置的超級(jí)熱啟動(dòng)Taq酶在合成DNA鏈的過程中，較普通Taq酶能夠更加高效地?fù)饺氲馗咝翗?biāo)記的核苷酸，而試劑盒配置的Dig Labelling經(jīng)反復(fù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，Dig-dUTP與未標(biāo)記核苷酸也處于最佳搭配比例，Dig-dUTP能夠大程度地?fù)饺隤CR產(chǎn)物，這使得BIOG地高辛標(biāo)記試劑盒的地高辛標(biāo)記效率顯著優(yōu)于部分同類產(chǎn)品。

以BIOG地高辛標(biāo)記試劑盒和同類試劑盒X分別標(biāo)記5ng Hela細(xì)胞DNA，5倍稀釋PCR產(chǎn)物，點(diǎn)樣于尼龍膜，再以NBT/BCIP進(jìn)行檢測(cè)，X公司PCR標(biāo)記試劑盒制備的探針，0.5pg點(diǎn)樣斑點(diǎn)可被有效檢測(cè)，而BIOG地高辛標(biāo)記試劑盒制備的探針，點(diǎn)樣量低至0.1pg，仍可被有效地檢測(cè)出來，這說明，同樣量的標(biāo)記探針，BIOG地高辛標(biāo)記試劑盒制備的探針中地高辛摻入量顯著優(yōu)于X公司。以上可見，BIOG地高辛標(biāo)記試劑盒具有非常優(yōu)異的探針標(biāo)記和制備性能。