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當(dāng)前位置:
新品上市 | 通用型miRNA 高特異定量PCR預(yù)混液(染料法)
來(lái)源: | 作者:百菱生物 | 發(fā)布時(shí)間: 560天前 | 632 次瀏覽 | 分享到:

此文章轉(zhuǎn)載自:莫納生物Monad

MicroRNA (miRNA) 是一類長(zhǎng)度約為 20-24 個(gè)核苷酸,進(jìn)化上高度保守的小分子非編碼 RNA,主要參與基因轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控。首個(gè) microRNA 發(fā)現(xiàn)于 1993 年,Victor Ambros 和 Gary Ruvkun 分別領(lǐng)導(dǎo)的兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室在線蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)了一種名為 lin-4 的基因, 這種基因并不編碼蛋白,而是表達(dá)一種長(zhǎng)度為 22nt 的小 RNA,可以抑制一種核蛋白 LIN-14 基因的表達(dá)從而調(diào)節(jié)線蟲(chóng)的發(fā)育。這種小 RNA 在 2001 年被命名為 microRNA(微小核糖核酸),簡(jiǎn)稱 miRNA。此后 miRNA 的研究取得了很大進(jìn)展,發(fā)表文獻(xiàn)也從 2001 年的 5 篇增加到了 2017 年的 13179 篇,增加了 2000 多倍。成千上萬(wàn)的 miRNA 在各種物種中被發(fā)現(xiàn),開(kāi)辟了一片全新而廣闊的科學(xué)研究領(lǐng)域。

目前,miRNA 研究方法已經(jīng)比較成熟:通過(guò)深度測(cè)序,尋找研究組和對(duì)照組的差異表達(dá)的 miRNA,再以實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 加以驗(yàn)證。運(yùn)用生物信息學(xué)分析尋找 miRNA  可能的靶點(diǎn)以及靶序列,可能涉及的信號(hào)通路,之后進(jìn)一步通過(guò)抑制目標(biāo) miRNA 或過(guò)表達(dá)觀察一些表型或基因表達(dá)變化;用熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)、pull-down 實(shí)驗(yàn)等來(lái)驗(yàn)證miRNA 與靶基因 mRNA 的直接結(jié)合,以探討發(fā)現(xiàn) miRNA 的作用機(jī)制。目前已經(jīng)證明,miRNA 的表達(dá)水平與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)系;miRNA 表達(dá)水平的監(jiān)測(cè)在疾病的早期診斷和預(yù)后觀察等方面具有十分重要的意義。






莫納上新

通用型miRNA 高特異定量PCR預(yù)混液(染料法)


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產(chǎn)品特點(diǎn)

■ 極強(qiáng)特異性

使用升級(jí)版化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,能有效抑制非特異性擴(kuò)增及引物二聚體產(chǎn)生


 更好的單堿基分辨能力

能夠較大限度區(qū)分家族miRNA不同成員間單個(gè)堿基的差異,定量更準(zhǔn)確


■ 靈敏度高

更適合miRNA定量的Buffer配方,靈敏度高,線性范圍寬廣 



■ 靈敏度高全平臺(tái)適用,無(wú)需單獨(dú)添加Rox
  
可完美兼容None/Low/High Rox模式的不同機(jī)型



性能展示

01

優(yōu)秀的單堿基分辨能力

選取序列高度同源的 let-7a 家族為靶標(biāo) miRNA,使用 MonAmp? miRNA Universal Super Specificity qPCR Mix、市場(chǎng)常見(jiàn) V 品牌及 T 品牌 MiRNA定量產(chǎn)品進(jìn)行單堿基區(qū)分能力的測(cè)試,結(jié)果顯示 MonAmp? miRNA Universal Super Specificity qPCR Mix 具有更強(qiáng)的單堿基分辨能力,能較大限度區(qū)分家族 microRNA 不同成員間單個(gè)堿基的差異。


02

寬廣的線性動(dòng)態(tài)范圍

以體外合成的 miRNA miR-Pic 為模板,使用 MonScript? miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit (Tailing Reaction) 進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,將合成的 cDNA 梯度稀釋線性擴(kuò)增,結(jié)果顯示 MonAmp? miRNA Universal Super Specificity qPCR Mix 擴(kuò)增效率高,可檢測(cè)低至 ag 級(jí)的 miRNA 表達(dá)。


03

全平臺(tái)適用,無(wú)需單獨(dú)添加Rox


MonAmp? miRNA Universal Super Specificity qPCR Mix可完美兼容不同機(jī)型(None/Low/High Rox 模式),表現(xiàn)出良好的通用性。



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