新品 | NEST細(xì)胞培養(yǎng)類試劑上市！打造優(yōu)質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境！
來源:
|
作者:百菱生物
|
發(fā)布時(shí)間: 472天前
|
546 次瀏覽
|
分享到:
細(xì)胞培養(yǎng)是生物實(shí)驗(yàn)里的入門實(shí)驗(yàn)也是普遍要做的實(shí)驗(yàn)，是后續(xù)操作的基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)，諸如篩選藥物、轉(zhuǎn)染、提取蛋白（RNA）等的進(jìn)展。
但基礎(chǔ)并不代表容易，影響細(xì)胞狀態(tài)的因素有很多，包括初始細(xì)胞的狀態(tài)、培養(yǎng)基、血清、孵箱溫度、CO2濃度、培養(yǎng)器皿等，每一個(gè)因素的都至關(guān)重要，一不小心就前功盡棄。
此文章轉(zhuǎn)載自： 無錫耐思NEST
細(xì)胞培養(yǎng)是生物實(shí)驗(yàn)里的入門實(shí)驗(yàn)也是普遍要做的實(shí)驗(yàn)，是后續(xù)操作的基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)，諸如篩選藥物、轉(zhuǎn)染、提取蛋白（RNA）等的進(jìn)展。
但基礎(chǔ)并不代表容易，影響細(xì)胞狀態(tài)的因素有很多，包括初始細(xì)胞的狀態(tài)、培養(yǎng)基、血清、孵箱溫度、CO2濃度、培養(yǎng)器皿等，每一個(gè)因素的都至關(guān)重要，一不小心就前功盡棄。
NEST 為您帶來更全面的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案，在原有的高品質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)耗材產(chǎn)品線的基礎(chǔ)上，全面上線針對(duì)于培養(yǎng)基（DMEM高糖培養(yǎng)基、RPMI1640培養(yǎng)基、DMEM/F-12培養(yǎng)基、α-MEM 培養(yǎng)基、McCoy's 5A培養(yǎng)基、Leibovitz's L-15培養(yǎng)基）、活力檢測(cè)（細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒）、細(xì)胞處理（抗生素/支原體清除劑、細(xì)胞消化解離試劑、細(xì)胞凍存試劑、平衡鹽溶液）三大方向所使用的試劑類產(chǎn)品，為高等院校、研究機(jī)構(gòu)、醫(yī)院、CRO 及 CDMO 企業(yè)提供更全面的服務(wù)。
本文將介紹NEST細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
NEST細(xì)胞培養(yǎng)基人工模擬動(dòng)物細(xì)胞的體內(nèi)生長(zhǎng)環(huán)境，維持體外細(xì)胞存活和增殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)基礎(chǔ)，其主要功能是為細(xì)胞提供適宜的pH和滲透壓，以及細(xì)胞本身不能合成的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
1. 根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要確定細(xì)胞培養(yǎng)基種類
細(xì)胞培養(yǎng)基有很多種，其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如：M199 、 IMDM 、 L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。
2. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇培養(yǎng)基的配方分型
● D-葡萄糖(D-Glucose)
作用：細(xì)胞生長(zhǎng)所需的主要能量來源
高糖型DMEM中的葡萄糖濃度為4.5g/L，普遍應(yīng)用于生長(zhǎng)快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn)，例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。
● L-谷氨酰胺(L-glutamine)
作用：L-谷氨酰胺是一種氨基酸,細(xì)胞的重要能量來源,參與蛋白質(zhì)的合成,也為合成核酸提供碳源。
存在的問題：
? L-谷氨酰胺不穩(wěn)定,在中性的水溶液中會(huì)自發(fā)降解。
? 降解產(chǎn)物氨對(duì)細(xì)胞有毒性。
解決方案：
對(duì)氨敏感的細(xì)胞（如干細(xì)胞和原代細(xì)胞等）或培養(yǎng)環(huán)境（高密度反應(yīng)器,無補(bǔ)料的長(zhǎng)期培養(yǎng)）不推薦含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可使用前自行添加L-谷氨酰胺或選擇穩(wěn)定的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺作為谷氨酰胺替代物。
●丙酮酸鈉(Sodium pyruvate)
作用：非必需組分，是一種能量來源。丙酮酸鈉在葡萄糖不足時(shí)可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，保證細(xì)胞更好地生長(zhǎng)。
● HEPES
作用：pH緩沖劑。是一種氫離子緩沖劑,其作用不依賴于二氧化碳。
在一定范圍內(nèi)對(duì)細(xì)胞無毒性作用，能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍，保證細(xì)胞良好生長(zhǎng)。
部分細(xì)胞對(duì)酸堿度的變化非常敏感,建議使用含有HEPES的培養(yǎng)基。
●酚紅(Phenol red)
作用：pH值指示劑。pH值低時(shí)培養(yǎng)基呈黃色，pH值高時(shí)培養(yǎng)基呈紫色，pH值7.2-7.4時(shí)為紅色，該區(qū)間最適合細(xì)胞培養(yǎng)。
? 在一些無血清培養(yǎng)基的配方中酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡培養(yǎng)，干細(xì)胞或細(xì)胞克隆時(shí)傾向于不加酚紅。
? 酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素），在培養(yǎng)激素敏感的細(xì)胞（如乳腺組織）時(shí)，建議使用不含酚紅的培養(yǎng)基。
? 酚紅的顏色會(huì)對(duì)流式細(xì)胞分析產(chǎn)生一定的干擾，不建議使用含酚紅的培養(yǎng)基制備細(xì)胞樣品。
●碳酸氫鈉(Sodium bicarbonate)
作用：pH緩沖劑。pH7.2-7.4為細(xì)胞生長(zhǎng)的最佳pH條件,多數(shù)培養(yǎng)基利用碳酸氫鈉進(jìn)行緩沖。
碳酸氫鈉的緩沖需要二氧化碳。高碳酸氫鈉(1.5-3.7g/L)需要5-10%二氧化碳;低碳酸氫鈉(0.35g/L)不需要二氧化碳培養(yǎng)箱。
干粉培養(yǎng)基需要在配制時(shí)單獨(dú)添加碳酸氫鈉。
NEST? 培養(yǎng)基在培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)和存活率方面均與進(jìn)口品牌相媲美，且顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)良好，長(zhǎng)期培養(yǎng)細(xì)胞效果穩(wěn)定，可以完美取代進(jìn)口培養(yǎng)基。
